Rat subcutaneous tissue response to MTA Fillapex® and Portland cement

The aim of this study was to evaluate the response of rat subcutaneous tissue to MTA Fillapex® (Angelus), an experimental root canal filling material based on Portland cement and propylene glycol (PCPG), and a zinc oxide, eugenol and iodoform (ZOEI) paste. These materials were placed in polyethylene tubes and implanted into the dorsal connective tissue of Wistar rats for 7 and 15 days. The specimens were stained with hematoxylin and eosin, and evaluated regarding inflammatory reaction parameters by optical microscopy. The intensity of inflammatory response against the sealers was analyzed by two blinded and previously calibrated examiners for all experimental periods (kappa=0.96). The histological evaluation showed that all materials caused a moderate inflammatory reaction at 7 days, which subsided with time. A greater inflammatory reaction was observed at 7 days in the tubes filled with ZOEI paste. Tubes filled with MTA Fillapex presented some giant cells, macrophages and lymphocytes after 7 days. At 15 days, the presence of fibroblasts and collagen fibers was observed indicating normal tissue healing. The tubes filled with PCPG showed similar results to those observed in MTA Fillapex. At 15 days, the inflammatory reaction was almost absent at the tissue, with several collagen fibers indicating normal tissue healing. Data were analyzed by the nonparametric Kruskal-Wallis test (α=0.05). Statistically significant difference (p<0.05) was found only between PCPG at 15 days and ZOEI at 7 days groups. No significant differences were observed among the other groups/periods (p>0.05). MTA Fillapex and Portland cement added with propylene glycol had greater tissue compatibility than the PCPG paste.

O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta do tecido subcutâneo de rato ao MTA Fillapex® (Angelus), a um cimento endodôntico experimental à base de cimento Portland e propilenoglicol, e à pasta de óxido de zinco e eugenol com iodofórmio. Estes materiais foram colocados em tubos de polietileno e implantados no tecido conjuntivo do dorso de ratos Wistar, por 7 e 15 dias. Os espécimes foram corados com hematoxilina e eosina e os parâmetros de reação inflamatória foram avaliados em microscópio óptico. A intensidade da resposta inflamatória provocada pelos cimentos foi analisada em todos os períodos por dois observadores previamente calibrados (kappa 0,96) e sem conhecimento dos grupos experimentais. O exame histológico mostrou que todos os materiais provocaram reação inflamatória moderada aos 7 dias que regrediu com o tempo. A maior resposta inflamatória do tecido foi observada aos 7 dias, nos tubos preenchidos com pasta de Óxido de Zinco e Eugenol com Iodofórmio. Os tubos com MTA Fillapex apresentaram algumas células gigantes, macrófagos e linfócitos após 7 dias. Aos 15 dias, a presença de fibroblastos e fibras de colágenas foi observada, indicando processo de cicatrização do tecido. Os tubos com o cimento Portland mostraram resultados semelhantes aos observados no grupo MTA Fillapex. Aos 15 dias, a reação inflamatória apresentada foi praticamente ausente, com muitas fibras colágenas, indicando cicatrização normal do tecido. A análise estatística mostrou diferença estatisticamente significante entre o grupo de cimento Portland (15 dias) e óxido de zinco eugenol com Iodofórmio (7 dias) (p<0,05). Nos outros grupos não houve diferença estatística significante. MTA Fillapex e cimento Portland são mais biocompatíveis do que os outros cimentos testados.

Cytotoxicity evaluation of two root canal sealers and a commercial calcium hydroxide paste on THP1 cell line by Trypan Blue assay

OBJECTIVE: The aim of this investigation was to evaluate the cytotoxicity of two brands of root canal sealers, epoxy-resin based and zinc oxide-eugenol based, and one commercial calcium hydroxide paste on a monocyte cell line THP-1. MATERIAL AND METHODS: Undiluted (crude extract) and diluted extracts to 10 percent, 1 percent, 0.1 percent, 0.01 percent, 0.001 percent and 0.0001 percent of the sealers were tested for cytotoxicity to THP-1 cells using the trypan blue assay. Extracts were obtained according to ISO standard. Data were analyzed statistically by the Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests at 5 percent significance level. RESULTS: Crude extract of AH Plus and Fill Canal killed approximately 90 percent of THP-1 cells versus 36 percent of THP-1 cells killed by L&C crude extract (p<0.05). Ten-fold dilutions of L&C, Fill Canal and AH Plus killed 24, 35 and 61 percent of THP-1 cells (p<0.05), respectively. Dilutions lesser than 1 percent caused minimal cell death as compared to the control groups (p>0.05), except for L&C 1 percent extract. CONCLUSIONS: The results revealed that the L&C paste crude extract was less cytotoxic to THP-1 cells than AH Plus or Fill Canal crude extracts.

Cytotoxicity evaluation of four endodontic sealers

This study evaluated in vitro the cytotoxicity of four root canal sealers (Topseal, EndoRez, TubliSeal and Kerr Pulp Canal Sealer E.W.T.) and their effects on reactive oxygen/nitrogen intermediate induction by mouse peritoneal macrophages. Thioglycollate-induced cells were obtained from Swiss mice by peritoneal lavage with 5 mL 10 mM phosphate-buffered saline, washed twice and resuspended (106 cells/mL) in appropriate medium for each test. Cytotoxicity was determined by the presence of hydrogen peroxide (H2O2) and nitric oxide (NO) by the peroxidase-dependent oxidation of phenol red and Griess reaction, respectively. Sealer suspensions were obtained in two different concentrations from each material: 18 mg/mL and 9 mg/mL, established according to compatibility parameters following MTT assay. Comparing the sealers, H2O2 release at concentrations of 9 mg/mL and 18 mg/mL was similar: Topseal > positive control (medium + cells + 5 mg/mL zimozan solution) > EndoRez > TubliSeal > Kerr Pulp E.W.T. > negative control (medium + cells). NO release at concentration of 9 mg/mL was: positive control (medium + cells + 10 µg/mL LPS solution) > Topseal > Kerr Pulp E.W.T. > TubliSeal = EndoRez > negative control (medium + cells); at concentration of 18 mg/mL was: positive control > Topseal > Kerr Pulp E.W.T > TubliSeal > EndoRez > negative control. Based on the results, it may be concluded that Topseal presented the highest cytotoxicity among the tested sealers, releasing higher concentrations of NO and H2O2 in macrophage culture.

Este estudo avaliou in vitro a citotoxicidade de quatro cimentos obturadores (Topseal, EndoRez, TubliSeal e Kerr Pulp Canal Sealer E.W.T) e seus efeitos na liberação de reativos intermediários do oxigênio e do nitrogênio em cultura de macrófagos peritoniais de ratos.Tioglicolato foi utlizado para se obter células peritoneias de camundongos. A cavidade peritoneal foi irrigada com 5 mL de solução salina 10 mM. As células foram lavadas duas vezes e foi feita uma suspensão (106 células/mL) em meio apropriado para cada um dos testes. A citotoxicidade dos cimentos foi determinada pela presença de peróxido de hidrogênio (H2O2) e óxido nítrico (NO) pela oxidação peroxidase-dependente do vermelho fenol e pela reação de Griess, respectivamente. Suspensões de cimento foram obtidas em duas diferentes concentrações para cada material: 18 mg/mL e 9 mg/mL, estabelecidas previamente pelo teste de viabilidade celular MTT. Comparando os cimentos, a liberação de H2O2 foi similar nas duas concentrações: Topseal > controle positivo (meio + células + Zimozan a 5mg/mL ) > EndoRez > TubliSeal > Kerr Pulp E.W.T. > controle negativo (meio + células). A liberação de NO na concentração de 9 mg/mL foi: de 9 mg/mL foi: controle positivo (meio + células + solução de LPS a 10 »g/mL) > Topseal > Kerr Pulp E.W.T. > TubliSeal = EndoRez > controle negativo (meio + células); e na concentração de 18 mg/mL; e na concentração de 18 mg/mL: controle positivo > Topseal > Kerr Pulp E.W.T > TubliSeal > EndoRez > controle negativo. Baseado nos resultados, pode-se concluir que o Topseal apresentou a maior citotoxicidade dentre os cimentos avaliados, liberando as mais altas concentrações de NO e H2O2 em cultura de macrófagos.

Citotoxidade de três cimentos obturadores do sistema de canais radiculares sobre cultura de células L929 / Citotoxicity of three filling cements of radicular canals system over L929 culture cells

O objetivo desse estudo in vitro foi avaliar a citotoxicidade dos cimentos Intrafill e Pulp Canal Sealer, ambos à base de óxido de zinco eugenol e um outro cimento, o Sealapex, à base de hidróxido de cálcio. Esse experimento foi realizado usando linhagem de células L 929 (de fibroblastos de camundongos). A citotoxicidade foi avaliada in vitro, usando-se o método de difusão em Agar, depois de 48 horas do endurecimento do cimento, o corante utilizado foi o vermelho neutro. Os resultados mostraram diferenças nas médias dos valores da viabilidade celular pelo teste ANOVA. Após o período determinado pela amostra, o Intrafill, e o Sealapex apresentaram alterações morfológicas celulares com maior citotoxicidade quando comparados ao Pulp Canal Sealer.

Avaliaçäo comparativa da toxidade do adesivo dentinário All Bond 2 e do cimento de óxido de Zinco e Eugenol, quando implantados no tecido conjuntivo subcutâneo de ratos / Comparative analysis of toxicity of dentin bonding agent All Bond 2 and Zinc Oxide and Eugenol implanted in subcutaneous tissue of rats

Com o objetivo de dar início ao estudo da biocompatibilidade do adesivo dentinário, All Bond 2 (Grupo experimental) quando comparado com o óxido de Zinco e Eugenol (Grupo OZE - controle), estes materiais foram implantados no tecido conjuntivo dorsal de 20 ratos. Decorridos os períodos de 7, 15, 30 e 60 dias, biópsias foram realizadas, sendo que após processamento laboratorial de rotina, os cortes histológicos de 6 *m de espessura foram corados com H/E. Como resultado, aos sete dias, o All Bond 2 promoveu intensa reaçäo inflamatória com predomínio de células mononucleares, moderada necrose de contato e degradaçäo de fibras colágenas, sendo que o cone capsular formado na área principal de análise foi amplo. Com o decorrer dos períodos houve tendência à regressäo do quadro inicial, mas a presença intensa de macrófagos e células gigantes ocorreu em alguns casos, até o último período de análise. No grupo controle, os achados histopatológicos foram menos intensos nos períodos iniciais de avaliaçäo, sendo que aos 30 e 60 dias, o tecido junto à abertura tubular, área principal de análise havia passado pelo processo de reparaçäo tecidual. Assim, apesar do adesivo dentinário All Bond 2 ter sido de maneira geral mais irritante do que o OZE, de acordo com as normas de ISO, foi possível concluir que ainda é um material aceitável quando implantado no tecido conjuntivo subcutâneo de ratos

Avaliaçäo da citotoxicidade de cimentos endodônticos, quanto à alteraçäo morfológica e à liberaçäo de peróxido de hidrogênio, em culturas de macrófagos peritoniais de camundongos / Evaluation of citotoxicity of endodontic cements in relation to morphological alterations and hydrogen peroxide liberation in culture of mouse peritonial macrophages

A citotoxicidade de cinco cimentos obturadores de canais radiculares, à base de hidróxido de cálcio (Sealapex, CRCS, Apexit e Sealer 26), e à base de óxido de zinco e eugenol (Fill Canal), foi avaliada em culturas de macrófagos peritoniais de camundongos. Utilizaram-se duas metodologias em culturas de macrófagos. A primeira relacionada à alteraçäo morfológica das células em contato com os cimentos após presa e a segunda, à liberaçäo de H2O2 pelas células em contato com os cimentos solubilizados. Os resultados permitiram concluir, revelando as limitaçöes metodológicas, que: 1) Na avaliaçäo da citotoxicidade através da alteraçäo morfológica dos macrófagos frente aos cimentos endodônticos, os mais citotóxicos foram em ordem crescente Fill Canal, CRCS, Sealer 26, Apexit e Sealapex. 2) Na avaliaçäo da resposta celular bioquímica dos macrófagos frente a esses cimentos, tendo-se como parâmetro o nível de H2O2 no meio de cultura dessas células, os mais citotóxicos, em ordem crescente foram CRCS, Sealapex, Apexit, Fill Canal e Sealer 26. 3) A avaliaçäo comparativa entre as metodologias mostrou a viabilidade de ambas como método de avaliaçäo citotóxica entre materiais de solubilidade semelhante